Диагностика инфекций, передающихся половым путем (ИППП) методом ПЦР-анализа

Диагностика инфекций, передающихся половым путем (ИППП) методом ПЦР-анализаЧто такое ПЦР-анализ?

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – самый быстрый и достоверный метод диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего его используют для выявления инфекций передающихся половым путем (ИППП) и вирусных гепатитов.

Полимеразная цепная реакция (Polymerase chain reaction) была открыта Кэри Б. Мюллисом в 1983 году, за что он и был удостоен Нобелевской премии. Часто ПЦР описывают как метод, с помощью которого ученые могут находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл.”Иглой” является крошечный фрагмент ДНК или РНК микроорганизма, характерный только для данного вида возбудителя заболевания.
В качестве исследуемого материала для ПЦР анализа могут использоваться различные биологические выделения (слизь, моча, мокрота), соскобы эпителиальных клеток, кровь, сыворотка.

Метод ПЦР диагностики существенно дополняет спектр традиционных методов и анализов, используемых в микробиологической диагностике. ПЦР диагностика эффективна для обнаружения микроорганизмов трудно выявляемых в лабораторных условиях, атипичных форм бактерий, внутриклеточных паразитов и микроорганизмов, способных длительно существовать в организме хозяина и вызывать хронические заболевания.

Как это делают?
1. Из биоматериала пациента в лаборатории с помощью специальных реагентов выделяется искомый участок ДНК/РНК.
2. Затем проводится полимеразная цепная реакция, в результате которой количество специфических фрагментов возбудителя многократно увеличивается в результате чего становится возможной детекция.
3. После этого с  помощью специальных маркёров определяется наличие (или отсутствие) фрагмента ДНК/РНК микроорганизма в биоматериале.

Какие особенности влияют на результаты ПЦР анализа?

В зависимости от периода инфицирования и состояния иммунной системы у любого пациента может быть отрицательный результат даже при наличии инфекции.
В сомнительных случаях рекомендуется провести повторный анализ через 10-14 дней.

Как правильно подготовиться к сдаче ПЦР-анализа?
Выбор клинического материала для исследования определяется наиболее вероятным местом локализации возбудителя. При анализе ЗППП материал для исследования у мужчин – соскоб слизистой оболочки мочеиспускательного канала, который помещается в пробирку со специальным реагентом.
У женщин дополнительно берется на исследование содержимое влагалища, цервикального канала матки, уретры. Решение о выборе материала для исследования принимается врачом на основании совокупности жалоб пациента и клинических проявлений инфекции.
Взятие биологического материала, по возможности, должно проводиться в период обострения инфекции. Количество материала, забираемого для исследования, не должно быть избыточным, т.к. вместе с возбудителем в пробу попадают вещества, которые могут вызывать тормозить ПЦР или могут способствовать разрушению ДНК при хранении и транспортировке. При взятии мазков и соскобов достаточное количество материала – размером “со спичечную головку”. Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный одноразовый урогенитальный зонд (щеточка), который собирает необходимое количество эпителия, не травмируя слизистую, почти не впитывает образец и хорошо отдает собранный материал в жидкую транспортную среду.

Рекомендации:

  • приходите на обследование в период обострения инфекции;
  • после незащищённого  полового контакта должно пройти не менее трех недель;
  • закончите прием антибиотиков за 3 недели до исследования на ИППП;
  • воздержитесь от половых отношений в течение 36 часов;
  • во время менструации исследование не проводится.

В день обследования на наличие ИППП:

  • Не проводите туалет половых органов, не применяйте дезинфицирующие средства и антибактериальное мыло.
  • От последнего мочеиспускания до взятия материала должно пройти не менее 3 часов.
  • Материал для исследования у женщин следует брать перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания. Женщинам нельзя спринцеваться; необходимо прекратить введение любых вагинальных свечей.
  • По согласованию с лечащим врачом за 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Какие возбудители могут быть найдены при ПЦР анализе?

Bacteroides spp. (Бактероиды) – поражение женских внутренних половых органов: цервициты, эндометриты, аднекситы, ВЗОМТ инфекции в малом тазу. Обнаруживают бактероиды и при простатитах, хронических осложнённых уретритах.

Chlamydia trachomatis (Хламидия) – именно она чаще всего причина негонококкового уретрита у мужчин (23–55%)

Cytomegalovirus (Цитомегаловирус) – Цитомегаловирусная инфекция опасна при заражении матери во время беременности.

Epstein Barr virus (Вирус Эпштейна-Барр) – инфекционный мононуклеоз или болезнь поцелуев, кроме того является одной из причин лимфогранулематоза,  причиной лимфомы Беркитта.  У многих людей, заражённых вирусом Эпштейна — Барр, болезнь проходит бессимптомно. В настоящее время данному вирусу наряду с другими герпесвирусами приписывается важная роль в формировании опухолевых клеток в организме человека.

Gardnerella vaginalis (Гарднерелла) – одна из причин бактериального вагиноза.

HPV (вирус папилломы человека) папилломавирусная инфекция, остроконечные кондиломы

HSV 1,2  (герпес вирусная инфекция)  -  генитальный герпес

Mobiluncus curtisii (мобилункус)  –  одна из причин бактериального вагиноза

Mycoplasma genitalium (Микоплазма) –  негонококковые уретриты (12–25%), простатиты.

Mycoplasma hominis (Микоплазма) – негонококковые уретриты, простатиты, воспалительные заболевания матки и придатков, пиелонефрит.

Neisseria gonorrhoeae (Гонококк) – гонорея относится к “классическим” заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). При этом заболевании возможно поражение мочеиспускательного канала (уретры), прямой кишки, глотки, шейки матки и глаз.

Toxoplasma gondii (Токсоплазма) -  Токсоплазмоз является одной из так называемых TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских названий инфекций: токсоплазма, краснуха, цитомегаловирус, герпес), являющихся опасными для плода.

Trichomonas vaginalis (Трихомонада) – Трихомониаз является одним из наиболее распространенных венерических заболеваний. У женщин поражается влагалище, у мужчин – мочеиспускательный канал и предстательная железа.

Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum, Ureaplasma spp.  -  негонококковый уретрит вызывается  Ureaplasma urealyticum (20–40%) уреаплазмы являются условно-патогенными микроорганизмами. Они способны вызвать ряд заболеваний.


Лекция добавлена 12.07.2012 в 04:19:31